زمینه و هدف: فن آوری بافت چربی به دلیل فراوانی و دسترسی آسان طی روند لیپوساکشن، منبع ایده آلی برای تهیه سلول های بنیادی مزانشیمی و تهیه داربست های طبیعی فراهم می آورد که موجب ترمیم و بازسازی مناسب بافت صدمه دیده نسج نرم می شوند. هدف این مطالعه جداسازی و تکثیر و شناسایی سلول های بنیادی از بافت چربی انسانی است.روش بررسی: برای انجام این تحقیق نمونه بافت استریل چربی از نواحی شکم و پهلوی بیماران جوان تهیه شد. با کمک آنزیم کلاژناز و سانتریفوژ مکرر، سلول های بنیادی بافت چربی جداسازی و کشت داده شد. تکثیر و چسبندگی سلول ها در کشت دوبعدی، شمارش سلولی با لام نئوبار انجام شد. سپس ماهیت سلول های بنیادی بافت چربی با به کارگیری روش فلوسایتومتری و بررسی مشخصات سطحی سلول ها و همچنین القای تمایز سلول ها به بافت استخوان و غضروف انجام شد.یافته ها: ماهیت مزانشیم بودن سلول ها، بر اساس بیان شاخص های CD90, CD105, CD166 و عدم بیان شاخص های رده خون ساز نظیر CD34, CD31, CD45 به وسیله تکنیک فلوسایتومتری تایید شد. رنگ آمیزی های هیستولوژیکی اختصاصی الیزارین رد و تولوییدن بلو به ترتیب تمایز سلول های بنیادی کاشته شده روی داربست را به سلول استئوسیت و غضروف تایید نمود.نتیجه گیری: هر چند در این تحقیق به مقایسه قدرت تکثیری و تمایزی این سلول ها در محیط داخل بدن پرداخته نشد، اما با توجه به نتایج ریخت شناسی، مطالعات فلوسایتومتری و تست های تمایزی به دست آمده می توان چنین نتیجه گیری کرد که جداسازی سلول بنیادی بافت چربی به روش به کار رفته در این مطالعه موفقیت آمیز بوده است و این سلول ها قابلیت استفاده در ترمیم بافتی را به روش پیوند خودی و یا غیر خودی خواهند داشت.

مقدمه و هدف: امروزه شدت و سرعت تولید در مرغان تخم گذار باعث بروز ناهنجاری‎های متعدد از جمله مشکلات استخوانی و اسکلتی شده است که زیان اقتصادی سنگینی را به‎دنبال دارد. انجام مطالعات روی سلول های بنیادی استحصال شده از مرغان تخم‎گذار می تواند باعث بهبود شناخت و درک ما از مکانیسم های تمایزی و مولکولی در سطح سلولی در این پرندگان شود. به‎همین منظور هدف از این مطالعه، استحصال سلول‎های بنیادی مزانشیمی از بافت چربی مرغان تخم گذار و کشت این سلول ها در شرایط آزمایشگاهی بود. مواد و روش ‏ها: در این تحقیق، سلول‎های بنیادی مزانشیمی طی شرایط استریل در محیط آزمایشگاه از بافت چربی احشایی مرغان تخم‎گذار (سویۀ های‎لاین w-36) جداسازی شد. سپس در شرایط محیط کشت استاندارد، سلول های موردنظر به‎وسیله تیمار با آنزیم کلاژناز از سایر سلول ها جدا شده بود. سلول‎های استحصال شده پس از چند بار سانتریفیوژ کردن و خالص‎سازی، در محیط کشت DMEM-F12 حاوی سرم جنین گاوی 10% کشت داده شد. در طول 21 روز، برای بررسی عملکرد سلول های جدا شده و توانایی رشد و تکثیر سلولی، روند رشد سلول‎ها و چگونگی تشکیل کلنی سلولی مورد ارزیابی قرار گرفت. سلول ها تا 14 بار با مورفولوژی طبیعی پاساژ داده شدند. برای بررسی سرعت رشد سلول ها این آزمون در پاساژهای 2، 4 و 8 تکرار شد تا کاهش توانایی رشد سلول ها با افزایش سن، مورد بررسی قرار گیرد. یافته‎ها:  حدود 3 الی 4 روز بعد از کشت، سلول های چسبیده 70-80 درصد فلاسک را پر کردند. میانگین روند رشد سلول‎ها در پاساژهای 2، 4 و 8 به ترتیب برابر 37/03، 60/92 و 101/42 درصد که نشان دهنده ارتباط، توانایی تکثیر و خود نوسازی سلول های بنیادی با سن آن­ها بود. بعد از گذشت 9 روز از کشت سلولی، تعداد کلنی‎های تشکیل شده از سلول های حاصل از پاساژهای 2 و 5 با غلظت های 175، 350 و 520 سلول در هر سانتی‎متر مربع پلیت 6 خانه‎ای به‎ترتیب برابر با 22، 62 و 84 کلنی بود. نتیجه‎گیری: نتایج این تحقیق نشان داد که سلول های بنیادی مزانشیمی استحصال شده از بافت چربی مرغان تخم‎گذار، توانایی حفظ خصوصیات بنیادی خود در طی تقسیمات سلولی متعدد را دارند و می‎توانند ساختار مورفولوژیکی و خصوصیات خاص خود از جمله عملکرد مربوط به رشد را حفظ نمایند.

هدف: مقایسه پتانسیل تکثیر و پیری سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان و بافت های چربی ناحه اپیدیدیم و اپی کاردیوم موش صحرایی.طرح مطالعه: مطالعه تجربی.حیوانات: 10 موش صحرایی با نژاد ویستار.روش کار: سلول های بنیادی از بافت مغز استخوان و بافت چربی واقع در نواحی اپیکاردیوم و اپیدیدیم موش صحرایی جداسازی شد و با انجام چند پاساژ سلولی تکثیر گردید. برای تایید ماهیت بنیادی مزانشیمی سلول های جدا شده، از تمایز به سه رده استخوان، غضروف و چربی استفاده شد و سپس سلول ها از لحاظ فعالیت کلون زایی، مدت زمان دوبله شدن جمعیت سلولی و ویژگی های منحنی رشد مورد مقایسه قرار گرفتند. به علاوه، تعداد سلول های پیر با روش رنگ آمیزی بتا گالاکتوزیداز تعیین و گروه ها از این نظر با همدیگر مقایسه شدند. نتایج: سلول های بنیادی مزانشیمی حاصل از دو بافت چربی بطور معنی داری بیش از سلول های بنیادی مغز استخوان تکثیر شدند (P<0.05). سلول های بافت چربی اپیکاردیوم در مقایسه با سلول های اپیدیدیم از توان تکثیری بالایی برخوردار بودند. در رابطه با پیر شدن سلول ها در محیط کشت، درصد سلول های پیر در کشت سلول های بنیادی مغز استخوان بیش از دو گروه دیگر بود (P<0.05). اگر چه درصد سلول های پیر در کشت سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی اپیدیدیم بیش از درصد آنها در کشت سلول های اپیکاردیوم بود ولی تفاوت از لحاظ آماری معنی دار نبود. نتیجه گیری و کاربرد بالینی: روی هم رفته می توان نتیجه گرفت که سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی اپیکاردیوم موش صحرایی سلول های مناسبی برای مطالعات تجربی و پیش کلینیکی می باشند زیرا از توان تکثیر بالایی برخوردار هستند و درصد سلول های پیر در کشت آنها پایین است.

سابقه و هدف: بافت چربی منبع قابل دسترسی برای سلول های بنیادی (Adipose tissue-derived mesenchymal stem cells; ADSCs) است. فاکتورهای نوروتروفیک، مولکول هایی هستند که در بقا، تکثیر و تمایز سلول های بنیادی نقش حیاتی دارند. هدف از این مطالعه بررسی ظرفیت تکثیری و قابلیت بیان فاکتورهای نوروتروفیک (NGF، CNTF، NT3، NT4، GDNF و BDNF) و همچنین بیان فیلامان بینابینی سلول های پیش ساز عصبی (نستین) در ADSC ها می باشد.مواد و روش ها: ADSC ها از بافت چربی زیرجلدی موش صحرایی بزرگسال به روش هضم مکانیکی و آنزیمی جدا شد. این سلول ها در محیط αMEM غنی شده با سرم 10 درصد FBS کشت شدند. سلول های پاساژ سوم به روش ایمنوسیتوشیمی برای نشان گرهای CD90 و نستین مورد ارزیابی قرار گرفتند. بیان فاکتورهای نوروتروفیک ذکر شده در ADSC ها به روش RT-PCR صورت گرفت. همچنین، این سلول ها در محیط القایی به سلول های چربی و استخوان تمایز داده شدند.نتایج: ارزیابی تعیین هویت و خلوص ADSC ها نشان داد که 90 درصد سلول ها برای نشان گر CD90 و 80 درصد آنها برای نشان گر نستین مثبت بوده اند. نتایج RT-PCR نیز نشان داد که فاکتورهای نوروتروفیک اشاره شده، در این سلول ها بیان شده اند. علاوه بر این، تعداد کمی از سلول ها به کرزیل ویوله واکنش دادند.نتیجه گیری: بافت چربی دارای جمعیت سلولی بنیادی است که به دلیل قابلیت تکثیر و توان تمایزی می تواند کاندید مناسبی برای پیوند سلولی در آینده باشد.

هدف: کشت و بررسی ماهیت سلولی و مولکولی سلول های بنیادی چربی اربیت و مقایسه آن با سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان و سلول های بنیادی چربی شکمی.روش پژوهش: جداسازی سلول های بنیادی از چربی اربیت، چربی شکمی و آسپیره مغز استخوان انجام پذیرفت. آنالیز فلوسیتومتری برای مارکرهای سطحی اختصاصی سلول های بنیادی، بررسی توانمندی تمایزی آن ها به رده های سلولی استئوبلاست و آدیپوسیت، بررسی میزان تکثیر آن ها با استفاده از تست MTT و ارزیابی میزان بیان ژن های پلوریپوتنسی با استفاده از Real-Time PCR صورت گرفت. ارزیابی قابلیت ترمیم نیز با آزمون های آزمایشگاهی ترمیم و توانایی بیان مارکرهای اپی تلیالی نیز با آزمایش های هم جوارسازی با هوا انجام شد.یافته ها: نتایج فلوسیتومتری نشان داد که مارکرهای CD105، CD90، CD44، CD166 در سلول های بنیادی اربیت (OFSCs) همانند سلول های بنیادی مغز استخوان (MSCs) و چربی شکمی (ASCs) دارای بیان مثبت و مارکرهای CD133، CD34، CD45، CD31 منفی بودند. تمایز به رده های سلولی آدیپوسیت و استئوبلاست در هر سه گروه دیده شد. در نتایج ترمیم آزمایشگاهی، سلول های OFSC در مقایسه با دو گروه دیگر با سرعت بالاتری ترمیم شدند. پس از هم جوارسازی با هوا، فقط در گروه OFSC مارکرهای اپی تلیال KRT3، KRT12 و کانکسین 43 مثبت بودند.نتیجه گیری: سلول های بنیادی چربی اربیت با منشاء اکتودرم توانایی بالایی در تکثیر و تمایز دارند. با توجه به امکان بیان مارکرهای اپی تلیالی و پتانسیل ترمیمی مناسب و هم چنین موضع قرارگیری آن در مجاورت چشم، شاید بتوان از این سلول ها در ترمیم نقائص پایدار اپی تلیوم قرنیه استفاده نمود.

مقدمه: در دیابت سلولهای بنیادی با شرایط نامساعد بافتی مواجهه هستند که برخی از آنها عبارتند از غلظت بالای گلوکز در خارج سلول، استرس اکسیداتیو و محرومیت از فاکتورهای رشدمتعاقب ایسکمی. هدف از این مطالعه بررسی تاثیر این شرایط بر سلولهای بنیادی است. روش کار: سلولهای بنیادی از بافت چربی زیرجلدی موشهای صحرایی جدا گردید. برای شبیه سازی حالت هیپرگلیسمی، سلولها 24 ساعت در محیط کشت حاوی mM 50-25 گلوکز نگهداری شدند. برای ایجاد مدل ایسکمی، سلولها برای 12 الی 36 ساعت در محیط فاقد گلوکز و فاکتورهای رشد تیمار شدند. به منظور القای استرس اکسیداتیو، 2O2H با غلظت μ M 800-100 برای 24 ساعت به محیط سلولها اضافه شد. زندهمانی سلولها با آزمون تیازولیل بلو تترازولیوم تعیین گردید. یافته ها: افزایش گلوکز محیط از mM 25 به mM 50 اثری بر زندهمانی سلولهای بنیادی نداشت. درصد سلولهای زنده پس از 12، 24 و 36 ساعت مجاورت با محیط فاقد گلوکز و فاکتورهای رشد کاهش یافت 05 / 0 > P غلظتهای μ M 400 و μ M 800 از 2O2H درصد سلولهای زنده را کاهش داد 05 / 0 > P. افزایش غلظت گلوکز محیط کشت سمیت سلولی ناشی از 2O2H را افزایش نداد. نتیجه گیری: سلولهای بنیادی در کوتاه مدت به استرس اکسیداتیو و محرومیت از گلوکز و فاکتورهای رشد حساستر از سمیت ناشی از گلوکز زیاد هستند. بنابراین، رادیکالهای آزاد اکسیژن و اختلالات خونرسانی از علل اصلی آسیب سلولهای بنیادی و لذا کاهش ترمیم بافتی در دیابت است.

زمینه و هدف: با توجه به گسترش استفاده از کشت های سلولی در روند مطالعات و تحقیقات، لازم است کنترل کیفی و تایید هویت رده های استاندارد تحقیقاتی بیشتر مورد توجه قرار گیرد. سلول های بنیادی دارای دو ویژگی اصلی، پتانسیل تولید و تکثیر سلول هایی با خواص یکسان (خود نو زایی) و ایجاد انواع سلول های تمایز یافته هستند. سلول های بنیادی مزانشیمی در بافت های مختلفی حضور دارند. امروزه این سلول ها به صورت وسیعی در فرآیند درمان، پزشکی بازساختی و حوزه های مرتبط با آن استفاده می شوند. لذا هدف از انجام این تحقیق فراهم ساختن زیرساخت مطمئن و دسترسی آسان به این سلول ها برای پژوهشگران است. روش کار: در این تحقیق بنیادی-کاربردی پس از جداسازی سلول ها از بافت چربی و پالپ دندان انسان و تایید عدم آلودگی آن ها به میکروارگانیسم های مهم نظیر مایکوپلاسما، تعیین هویت سلول های مزانشیمی با استفاده از روش های مختلف مانند بررسی و اندازه گیری خواص رشد آن ها، بررسی بیان مولکول های اختصاصی و قابلیت تمایز آن ها به سلول های چربی و استخوانی انجام شده است. یافته ها: در این طرح تعداد شش رده سلول های بنیادی مزانشیمی از بافت چربی و پالپ دندان، جداسازی، تعیین هویت و ذخیره شد که این سلول ها از لحاظ بیان CD90، CD105 و CD29 مثبت بوده و از لحاظ بیان CD34 و CD45 منفی هستند. همچنین این سلول ها فاقد آلودگی باکتریایی، ویروسی و مایکوپلاسما هستند و قادرند در شرایط آزمایشگاهی به سلول های استخوانی و چربی تمایز یابند. نتیجه گیری : معرفی رده های سلولی مزانشیمی با هویت و شناسنامه مشخص، منجر به تسهیل و تسریع تحقیقات زیست پزشکی در زمینه سلول های مزانشیمی انسانی همراه با کاهش قابل توجه هزینه ها در کشور خواهد شد.

لطفا برای مشاهده چکیده به متن کامل (PDF) مراجعه فرمایید.